隨著科技的進(jìn)步MVE液氮罐也被眾多領(lǐng)域所應(yīng)用，不管是生活中還是生產(chǎn)中都能看到它的身影，如醫(yī)療行業(yè)，生物醫(yī)學(xué)行業(yè)，金屬生產(chǎn)行業(yè)以及精密儀器等。今天為大家介紹的是細(xì)胞在液氮罐保存方法及步驟

一、MVE液氮罐的應(yīng)用范圍及用途

1.在生物醫(yī)學(xué)行業(yè)中的應(yīng)用：目前主要是用于牛、羊等優(yōu)良種公畜以及珍惜動(dòng)物的精液保存，以及遠(yuǎn)距離的運(yùn)輸和醫(yī)學(xué)中的疫苗、菌毒種、細(xì)胞以及人、動(dòng)物的器官等浸泡于成都金鳳液氮罐儲(chǔ)存的液氮中，長(zhǎng)期活性保存。

2.在金屬生產(chǎn)行業(yè)中的應(yīng)用：利用成都金鳳液氮罐中儲(chǔ)存的液氮對(duì)金屬材料進(jìn)行深冷處理，可以改變金屬材料的金相組織，顯著提高金屬材料的硬度、強(qiáng)度和耐磨性能。

精密儀器電子行業(yè)中的應(yīng)用：將精密零件經(jīng)過(guò)液氮深冷處理后進(jìn)行裝配，提高零件裝配質(zhì)量，從而提高設(shè)備或儀器的整機(jī)性能。

3.醫(yī)療衛(wèi)生行業(yè)的應(yīng)用：用液氮容器內(nèi)儲(chǔ)存的液氮作為制冷劑進(jìn)行手術(shù)，治療或冷藏冷凍細(xì)胞、組織等。冷療儀用于醫(yī)院臨床各科室能夠代替手術(shù)，安全無(wú)毒，無(wú)害痛苦少，不損害健康組織，殺菌效果良好。

4.美容領(lǐng)域的應(yīng)用：主要用液氮的超低溫來(lái)處理皮膚表層。如采用手術(shù)治療，疤痕往往是不可避免的后遺性缺陷，而冷凍治療卻不會(huì)出現(xiàn)這些情況，而且效果也比較理想。

二、細(xì)胞在液氮罐保存步驟：

怎么在液氮罐里儲(chǔ)存細(xì)胞呢?一般來(lái)講，凍存細(xì)胞的步驟會(huì)影響到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力，所以在使用液氮罐儲(chǔ)存細(xì)胞時(shí)應(yīng)小心并按步驟操作：

1、預(yù)先配制凍存液：10 % DMSO + 90%胎牛血清，4℃冰箱保存預(yù)冷;

2、用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化：倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基，PBS沖洗兩次，用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);

3、再次用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞，將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中，用滴管輕輕吹打混勻。

4、在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液，密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞名稱(chēng)和凍存日期。

5、凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力，如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜，放入液氮罐最好;或者可以在4℃，2h;

三、細(xì)胞在MVE液氮罐的儲(chǔ)存分為兩種：

液氮罐里一般灌有低溫液氮，細(xì)胞的儲(chǔ)存需要低溫環(huán)境，放入-196度的液氮里對(duì)細(xì)胞是長(zhǎng)期保存的一個(gè)適合的環(huán)境。常規(guī)液氮罐是將細(xì)胞存入液氮罐的液相里儲(chǔ)存，有專(zhuān)用的方形抽屜式提籃，2ml凍存管放入凍存盒然后再放入提籃后浸入液氮里，完全浸入。使細(xì)胞完全處于液氮-196度環(huán)境下，才能夠長(zhǎng)期保存細(xì)胞。

還有一種是氣相儲(chǔ)存，氣相儲(chǔ)存的話(huà)，溫度比液相儲(chǔ)存要高一些，不過(guò)也能達(dá)到-190度，對(duì)于細(xì)胞儲(chǔ)存來(lái)講，也是足夠了的。而且還能解決長(zhǎng)期以來(lái)液相儲(chǔ)存細(xì)胞經(jīng)常出現(xiàn)而又難以避免的一些問(wèn)題，比如樣品污染，出罐爆管等等。相對(duì)來(lái)說(shuō)，液相液氮罐相比氣相來(lái)說(shuō)，相同體積的液氮罐保存的時(shí)間也久一些.氣相凍存的溫度稍微高一些,但相同體積的液氮罐保存的時(shí)間短一些(液氮量少,所以加液氮的頻率要高一些).氣相需要頻繁加液氮。